外泌體萃取技術-如何使用切向流過濾純化外泌體?
外泌體萃取技術-如何使用切向流過濾純化外泌體?
外泌體是什麼?
外泌體是一種由細胞自行生成的細胞外囊泡,包裹在膜內。外泌體存在於多種生物體液中,如血液、尿液和唾液。它們在多種生理和病理過程中扮演著重要的角色。
由於外泌體能夠在細胞間轉移蛋白質、脂質和DNA、RNA等遺傳物質,所以在再生醫學、癌症研究、生技製藥等領域的生物醫學研究和臨床應用中受到極大關注。近年來,外泌體研究是一個迅速發展的領域,不斷有新的應用和治療可能性被發現。
外泌體分離的方法
要從組織培養上清液、血液、尿液或其他體液中分離外泌體,涉及到多種方法,其中「過濾法」是最常用的外泌體分離技術之一。
然而,傳統的過濾法通常需要先經過離心處理以澄清樣品,然後再透過多孔過濾膜進行進一步的外泌體純化,而這種方法可能會因過濾膜類型對脆弱的外泌體造成損害,使分離效果不如預期。
切向流過濾與傳統過濾的比較
傳統過濾法
傳統過濾法是將含有外泌體的樣品通過特定孔徑的多孔過濾膜。該過程讓較小的外泌體通過過濾膜,而較大的顆粒則被攔截在膜表面。
不過,這種方法的缺點是,濾膜攔截的大分子物質會在濾膜表面逐漸推積,形成過濾餅層。隨著過濾時間延長,這層濾餅層會變得越來越厚,導致過濾效率下降,且濾膜的使用壽命也會因此變短。
切向流過濾(TFF)
切向流過濾(TFF)則是一種將含有外泌體的樣品以水平方向經過濾膜的過濾方法,使樣品與濾膜呈平行流動,這樣不僅促進了過濾過程,同時也在系統循環中清洗濾膜表面,減少大分子物質的累積。這有效防止大分子推積在濾膜上,保持穩定的流速,顯著延長過濾膜的使用壽命。
切向流過濾的另一個優點是,它能夠同時進行樣品的濃縮和透析過濾,而傳統過濾則需要樣品分別進行離心濃縮和過濾步驟,大幅節省外泌體純化的時間。
切向流過濾的應用
切向流過濾因其便利性與多功能性,成為多種需要過濾和純化生物分子的工業和科學過程中的理想選擇。由於上述優勢,切向流過濾在生物技術和生物醫學領域越來越受到青睞,因此現已廣泛被應用於醫院和製藥行業。
其中,Tanfil 100切向流過濾系統特別適合用於外泌體過濾,其溫和的過濾過程能減少對外泌體的損害,確保處理樣品的完整性。Tanfil 100的重要優點還包含:
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